煙草花葉病毒檢測的作用和技術特征

更新時間：2023-03-26

點擊次數：881

　　煙草花葉病毒檢測可在多種植物上越冬，也可附著在番茄種子上、土壤中的病殘體上越冬，田間越冬寄主殘體、烤曬后的煙葉、煙絲均可成為該病的初侵染源。主要通過汁液接觸傳染，只要寄主有傷口，即可侵入。黃瓜花葉病毒主要由蚜蟲傳染，此外用汁液摩擦接種也可傳染。冬季病毒多在宿根雜草上越冬，春季蚜蟲遷飛傳毒，引致發病。番茄病毒病的發生與環境條件關系密切，一般高溫干旱天氣利于病害發生。此外，施用過量的氮肥，植株組織生長柔嫩或土壤瘠薄、板結、黏重以及排水不良發病重。番茄病毒的毒源種類在一年里往往有周期性的變化，春夏兩季煙草花葉病毒比例較大，而秋季黃瓜花葉病毒為主。因此，生產上防治時應針對病毒的來源，采取相應的措施，才能收到較滿意的效果。

　　煙草花葉病毒檢測樣品的收集、處理及保存方法：

　　1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

　　3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃。

　　煙草花葉病毒檢測試劑盒及檢測方法，屬于植物病毒檢測技術領域。本發明的煙草花葉病毒定量檢測試劑盒包括如下分裝試劑和酶標板：所述酶標板為煙草花葉病毒抗體預包被酶標板；所述分裝試劑為：樣品稀釋液，為磷酸鹽緩沖液；洗滌液，含質量分數為0.1～0.5％的Tween?20的磷酸鹽緩沖液；反應終止液，濃度為1.8～2.2mol/L的H2SO4溶液；酶標抗體工作液，辣根過氧化物酶標記的濃度為2μg/ml的特異性鼠抗煙草花葉病毒單克隆抗體；顯色劑；煙草花葉病毒標準品。本發明的試劑盒能夠實現煙草花葉病毒的定量檢測，且快速、準確度高、靈敏度高。